Ez a cikk a csapadékreakció jelenségének lesz szentelve. Itt megvizsgáljuk ennek a jelenségnek a megfogalmazásának jellemzőit, a diffúzió jelenségét, az általános jellemzőket, az emberi életben betöltött szerepét és még sok minden mást.
Bevezetés a jelenségbe
A kicsapódás egy szerológiai típusú jelenség, amelynek során az oldható antigének kölcsönhatásba lépnek az antitestekkel, és ennek eredményeként kicsapódás – csapadék – figyelhető meg.
A kicsapódási reakció általános jellemzője a az antigén és az antitest összehangolt hatása. Az ilyen típusú kölcsönhatások lehetővé teszik ismeretlen antigének jelenlétének meghatározását a vizsgált anyagban ismert antitestek és antigének hozzáadásával. A sók jelenléte nélküli kicsapási folyamat rosszabbul megy végbe, és a legjobb optimum a 7,0-7,4 pH tartományban van.
A reakció összetevői
A csapadékreakció komponensei között három fő elem van:
- Molekuláris természetű antigén. Finom típusú állapotban van, más szóval ezoldódó. Az ilyen antigént precipitogénnek is nevezik, amely lizátum vagy szövetkivonat stb. A precipitogén jellegzetes különbséget mutat az agglutinogéntől, ami a részecskék méretében rejlik, amelyekből áll. Az agglutinogénnek saját sejtmérete van, és a precipitogének arányosak a molekula méretével. Az antigénoldatot az átlátszóság jellemzi.
- Emberi vérszérumban, valamint immundiagnosztikai szérumban található antitest, amely a vizsgált antitesteket tartalmazza.
- Az elektrolitok nátrium-klorid oldatok, amelyek izotóniás hatásúak.
Precipitogén termelés
A kicsapási reakció létrehozása lehetetlen precipitogén nélkül, amelyet anyagok őrlésével és fehérje antigének kivonásával nyernek. Az extrahálás forralással vagy más módszerekkel történik.
A lizátok, valamint a szövet- és szervkivonatok, a vérszérum, a mikrobiális húsleves tenyészeteken alapuló különféle szűrletek, valamint a mikroorganizmusok sókivonata és az autolizátum anyagok szembetűnőek. példa a precipitogénekre.
Beállítás csapadékban
Most nézzük meg a kicsapási reakció beállításának módját.
Gyűrűs-kicsapási reakciót hajtanak végre, amely speciálisan előkészített kémcsövekben megy végbe. A szérumot az edények üregébe vezetik, pipetta kifolyó segítségével a falra öntik. Ezután a megfelelő mennyiségű csapadékot óvatosan a tetejére rétegezzük, majd a csövet vízszintesből függőleges helyzetbe hozzuk. A csapadékreakció beállítása és figyelembe vétele nagyon aprólékos művelet. Az eredményt egy fehér gyűrű megjelenése után rögzítjük az antigén és az antitest határán. Ha a reakció reagáló elemei megfelelnek egymásnak, akkor kötődnek, de ez hosszú kölcsönhatásuk után válik észrevehetővé. tárgylemez, ahová az agar gélt átvisszük, kis rétegben felhordva. Miután megkeményedik a gélben, kis számú lyukat vágnak ki, amelyekbe antigéneket és antitesteket helyeznek el. Ennek a műveletnek két módja van: a radiális immundiffúzió és a kettős immundiffúzió.
Általános információ
A csapadék működésének mechanikája hasonló az agglutináló berendezéséhez. Az immuntípusú szérum hatására a reakcióba már belépett antigén csökkenti a diszperzitás mértékét. Fontos feltétel a szérum és az antigén átlátszósága.
Javíthatja a reakció regisztrálását, ha antigéneket helyez az antitestekre. Ennek eredményeként gyűrű alakú csapadék megjelenése figyelhető meg. Ezt a jelenséget gyűrűs kicsapásnak nevezik, és speciális, 2,5-3,5 mm átmérőjű csövekben hajtják végre. A precipitációs reakció egyik leggyakoribb példája a lépfene diagnózisa.
A csapadék segítségével meghatározható a diftéria-tenyészet toxicitásának mértéke agaron.
A vizsgált reakció soránantigén komplexek és antitestek kicsapódása következik be. A kicsapódás egy immunológiai jelenség, amely lehetővé teszi az antitestek mennyiségének meghatározását egy beteg vagy beoltott személy és állatok vérszérumában.
Titrálás következménye
Fontos tudni, hogy a fenti módszerrel titrálással kapott adatok nem számszerűsíthetők. M. Heidelberger és E. Kabat egy speciális reakciótechnikát dolgozott ki, amely az ekvivalencia zóna keresésén és azonosításán alapul a benne lévő antitestek számának kvantitatív értékelésének elkészítéséhez és elemzéséhez. Az antigének korszámának állandó térfogatú antiszérummal való keverése a kezdetben képződött csapadék növekedéséhez, majd az antigénkomplexek oldóképességének növekedése miatt ismét csökken. Az egyes kémcsövekben lévő felülúszókban lévő antitestek mennyiségének meghatározásával megállapíthatja, hogy bizonyos számú antitestet tartalmazó edényből hiányzik a folyadék. Itt, más kémcsövekkel összehasonlítva, a legnagyobb csapadék képződik. Ennek és az antigén fehérjecsapadéknak a fehérjék összértékéből való levonása révén lehetővé válik a vizsgált specifikus szérum térfogatában lévő antitestek pontos értékének meghatározása. Továbbá a csapadékban lévő fehérjemolekulák mennyiségét a nitrogén mennyiségével vagy kolorimetriás módszerekkel határozzuk meg.
Értékek értékelése
A diagnosztikai módszertanban a precipitációs értékek becslésénél figyelembe kell venni annak lehetőségét, hogy az immunszérumban olyan antitest is jelen legyen, amely nem rendelkezik precipitáló tulajdonsággal, amiből az következik, hogy maga a csapadék nem antigénekkel való reakció után keletkezik. Az ilyen molekulák listája tartalmaz hiányos antitesteket és néhány fajt a gamma-A globulinok csoportjából.
A kicsapódási reakció laboratóriumi körülmények között többféle módosításban is alkalmazható. Például a termoprecipitációs reakciót a botulizmus, lépfene stb. bakteriális antigének kimutatására használják, amelyek nem mennek át termikus denaturáción. A gyűrűs kicsapással ellentétben ez a fajta reakció a kérdéses anyag szűrleteit forr alt állapotban alkalmazza.
A kicsapási reakció elemzése összetett keverékben nem teszi lehetővé a keverék egyes elemeinek tulajdonságainak jellemzését. Ilyen esetekben az agarban történő kicsapás módszerét alkalmazzák, és immunelektroferézist is alkalmaznak.
Diffúz csapadék
A kutatás ezen a területén létezik a diffúz csapadékreakció (RPD) koncepciója. Az antitestek és oldható antigének gélben való diffúziójának képességén alapul. A diffúzió egy bizonyos anyag molekulájának azon képessége, hogy behatoljon egy másik molekulába, amit hőmozgás okoz.
A gél egy diszpergált típusú rendszer, amelyben a folyékony fázis egyenletesen oszlik el a szilárd fázisban. Leggyakrabban agar gélt használnak az ilyen reakciókhoz.
A paraméterek megadása után aolyan körülmények között, amelyek között a molekulák egymáshoz képest diffundálódhatnak, találkozásukat antigén + antitest komplex képződése kíséri. Az ilyen neoplazma képes diffundálni, mivel magában a gélben van, és kicsapódik, szabad szemmel észlelhető csík formájában. Ha az antigén és az antitest homológ, nem képződik sáv.
A diffúziós körülmények megteremtése az agarrétegben a komponensek öntésével jár, de a lyukak teljes számát és egymáshoz viszonyított helyzetét a dönti el a szükséges feladat típusát. Az RPD lehetővé teszi az ismeretlen izolált vírusok kimutatását és azonosítását ismert antitest-szérummal végzett teszteléssel.
Alkalmazás
A csapadékot széles körben alkalmazzák nemcsak betegségek diagnosztizálásában, hanem az igazságügyi orvosszakértői vizsgálatban is. Nehéz elképzelni egy olyan elemzést, amelyben meg lehetne határozni, hogy a kicsapási reakciót nem alkalmazó bűnügyi fegyveren milyen vérfajtát, szerv- vagy szövetrészt találtak. Ennek során kicsapó szérumokat használnak, amelyeket különféle állatok és madarak immunizálásával nyernek. Fontos, hogy a szérum titer szintje ne legyen kevesebb 1:10000-nél, és kellő specifitású is legyen. A kimutatott vérfoltból vagy kérgéből fizikai kivonatot készítenek. megoldást, amely tovább lesz kitévekicsapó szérum. E reakció szerint meg lehet határozni az ember és az állat szöveteinek és szervi fehérjéinek típusait. A zavaros kivonatok készítése arra kényszeríti az embert, hogy az agar csapadékához folyamodjon.
Következtetések
Az olvasott információkat elemezve megállapíthatjuk, hogy a precipitációs reakciók rendkívül fontosak az ember számára, mivel lehetővé teszik a különféle antigének diagnosztizálását antitestek segítségével, ezt a jelenséget széles körben alkalmazzák az igazságügyi orvosszakértői vizsgálatban is, és lehetővé teszi a kicsapódás típusának azonosítását. vér, szövet vagy szerv egy adott alanyhoz kapcsolódóan. A csapadéknak többféle típusa és módja létezik, amelyeket a megoldandó probléma felmerülő igényeinek megfelelően alkalmaznak.
