A bakteriális fertőzések sokfélesége megköveteli a kórokozó egyértelmű azonosítását és fajának meghatározását. A mikroorganizmus típusának meghatározásában a mikrobiológusokat segítik annak színező tulajdonságai - a mikroba érzékenysége a különböző festékekkel való festődésre. Ez a módszer lehetővé teszi a kórokozó morfológiájának feltárását. A baktériumok színező tulajdonságai nagy jelentőséggel bírnak a mikrobiológia területén folyó gyakorlati és elméleti kutatások szempontjából.
Mikrobakutatás
A bakteriológiában számos módszer létezik a mikroorganizmusok megfestésére. Mindegyik a baktériumok színező tulajdonságain alapul. A festés lehetővé teszi alakjuk, szerkezetük, méretük, relatív helyzetük meghatározását. Ez lehetővé teszi az általános biológia és az összehasonlító mikrobiológia mikroorganizmustípusainak rendszerezési problémáinak megoldását.
Miért fesd le őket
A baktériumok gyakorlatilagátlátszó organizmusok, és festés nélkül a hagyományos mikroszkóppal rosszul láthatóak. Speciális mikroszkóppal (fáziskontraszt, sötét mező) lehet tárgyakat tanulmányozni, de a legegyszerűbb a festés, ami után a baktériumok láthatóvá válnak a hagyományos fénymikroszkóppal.
Mintaelőkészítés
Az alkalmazott festési technikától függetlenül egységes szabályok vonatkoznak a vizsgált tárgy előkészítésére. A következő szakaszok kötelezőek:
- A steril eszközök kenetet ejtenek egy tárgylemezen.
- A minta szárítása folyamatban van. Ezt szobahőmérsékleten vagy szárítószekrényben kell elvégezni.
- Ezt követi a rögzítési szakasz – a mikroorganizmusokat speciális vegyületekkel rögzítik az üveghez.
- Megfelelő festés – a mintát meghatározott ideig festékkel fedjük, majd lemossuk.
- Végső szárítás – a minta ismét megszárad.
A leggyakoribb színezékek
A leggyakrabban használt színezékek különböző savértékű (pH) anilin alapúak. A legtöbb festék por, amelyet alkoholban hígítanak.
Azokat a festékeket, amelyekben a kationok a színezőanyagok, bázikusnak nevezik (pH nagyobb, mint 7). Használhatók mikroorganizmusok vörös (bíbor, szafranin), ibolya (metilibolya, tionin), kék (metilénkék), zöld (malachitzöld), barna (krizoidin) és fekete (indulin) festésére.
Azokat a festékeket, amelyekben a színezőanyagok anionok, savasnak nevezik (pH kisebb, mint 7). Vörösre (eozin), sárgára (pikrin) vagy feketére (nigrozin) festik a mintát.
Van egy csoport semleges színezék (például rodamin B), ahol mind a kationok, mind az anionok színezőanyagként hatnak.
A kultúra él vagy halott
A festési módszereket két csoportra osztják a próbatest életformája szerint.
- Vital (élettartam) festés. A mikroorganizmusok tulajdonságainak tanulmányozásának ezt a módszerét az élő szövetek tanulmányozására használják, amely lehetővé teszi a mikrobák létfontosságú folyamatainak megfigyelését. Ehhez a festéshez alacsony toxicitású és nagy áthatolóképességű festékeket használnak.
- Post-vital festés. Ez az elh alt vagy elpusztult mikroorganizmusok festése. A baktériumok színező tulajdonságainak köszönhetően a mikrobiológusok meghatározzák szerkezetüket. Ezt a festést használják a legszélesebb körben.
Gram-pozitív és Gram-negatív
Ezek a baktériumok jellemzői találhatók meg a különféle gyógyszerek használati utasításában. A baktériumok színező tulajdonságainak tanulmányozásának ez a módszere enciánibolya festék és jódrögzítés használatán alapul. Ez Hans Christian Gram dán orvos technikája, aki 1884-ben javasolta. A festés eredményeként a baktériumok két csoportra oszthatók:
- Gram (+) - kékre vált(staphylococcusok és streptococcusok).
- Gram (-) – rózsaszíntől vörösig terjedő folt (enterobaktériumok, szalmonella, E. coli).
A különböző festési eredmények a baktériumfalak eltérő színárnyalati tulajdonságainak köszönhetők. Egyes fertőző betegségek diagnosztizálásában továbbra is a Gram-festési módszer a fő módszer.
Egyéb festési technikák
Jellemezzünk még néhány, a bakteriológiában széles körben használt módszert.
- Ziehl-Nelson módszer - meghatározza a baktériumok savállóságát. Azonosítja a tuberkulózis és a mikobakteriózis kórokozóit.
- Romanovsky-Giemsa technika – az acidofil (ecetsav és tejsav) baktériumokat vörösre, a bazofil (spirocheták és protozoonok) kékre festik.
- Morozov technikája – barnára festi a baktériumokat, és láthatóvá teszi flagellájukat.
Spórák láthatók
A Tsiel fuchcin festése lehetővé teszi a baktériumspórák megtekintését. A festés után rózsaszín színűek, jól láthatóak a kék baktériumok hátterében. Ez a módszer a bakteriológia egyik eszköze, és nagy gyakorlati jelentőséggel bír.
