A modern orvostudomány sajátos diagnosztikai módszerekkel rendelkezik, amelyek lehetővé teszik az emberben előforduló betegségek etiológiájának megállapítását a kórokozó, az immunválaszt serkentő genetikailag idegen anyagok, a nukleinsavak, valamint az allergiás és immunelváltozások alapján. amelyek az ő tettei miatt következnek be. Manapság a RIA-t széles körben használják az immunológiában és a virológiában, azaz a radioimmunoassay-ben, amelynek céljait, összetevőit, lefolyását, elszámolását ebben a cikkben tárgyaljuk. Ez a vizsgálat képes kimutatni az antigéneket az antitestekkel való kölcsönhatásuk eredményeként.
Definíció
A
RIA a folyadékokban lévő biológiailag aktív anyagok diagnosztizálására szolgáló módszer, amely az antigének antitestekkel való reakcióján alapul, amikor radionukliddal jelölt analóg anyagokat használnak, amelyek speciális kötőrendszerrel rendelkeznek. Interakciójuk utánimmunkomplex képződik, amelyet elválasztanak és radioaktivitását vizsgálják. Ismeretes, hogy a radioimmunoassay-t standard reagenskészletekkel végzik.
Minden reagens képes meghatározni egy adott anyag koncentrációját. Az embertől vett biológiai folyadékot összekeverik egy reagenssel, az inkubációs idő letelte után a szabad és megkötött radioaktív anyagokat szétválasztják, majd radiometriát végeznek, és kiszámítják az eredményeket. Az anyagok jelölésére a jód izotópját használják. Meg van jelölve és bizonyos mennyiségben hozzáadva.
Alkalmazás
A radioimmunelemzés széles körben alkalmazható az orvostudományban és a mikrobiológiában. Szív- és érrendszeri betegségek, endokrin és egyéb testrendszerek betegségeinek diagnosztizálására használják. A RIA-kat gyakran használják a meddőség okának, a magzati fejlődés patológiájának azonosítására is. Az onkológiában ezt az elemzést a neoplazmák markereinek meghatározására végzik, hogy ellenőrizni lehessen a kezelés hatékonyságát. Az immunológiában a RIA-t immunglobulinok, enzimek, fehérjék stb. jelenlétének vizsgálatára használják a vérben. Ma ez az elemzés lehetővé teszi a különböző hormonok koncentrációjának kimutatását egy gramm milliomod részéig. Így a radioimmun vérelemzést széles körben alkalmazzák a kardiológiában, onkológiában, endokrinológiában, nőgyógyászatban és virológiában.
RIA-módszerek
Szokásos különbséget tenni több elemzési módszer között, a természettől függőenreakciók:
- A nem kompetitív módszert olyan reakciókomponensek jellemzik, mint a standard és kimutatható antigének, pufferoldat, izotóppal jelölt antitestek, bizonyos antitestek, amelyek a szorbenshez kötődnek. A vizsgálandó antitestekhez antigént adnak. Inkubálás után antigén-antitest komplexek jelennek meg, a szorbenst lemossák, jelölt antitesteket adnak hozzá, amelyek a komplexben lévő antigénhez kötődnek. A radioaktivitás a vizsgált antigén koncentrációjától függ.
- A kompetitív radioimmunoassay-t az antigénverseny vezérli. Itt vannak a reakció olyan komponensei, mint a kontroll és meghatározott antigének, egy pufferoldat, bizonyos antitestek, amelyek a szorbenshez kötődnek, valamint egy izotóppal jelölt antigén. A diagnózis a vizsgált antigén bevezetésével kezdődik. A szorbensen antigén-antitest komplex képződik. Ezután a szorbenst mossuk, és a jelölt antigént injektáljuk. Ennek során az antitesthez kötődik. Számlálók segítségével mérik a reakciót és a radioaktivitás mennyiségét. Ez fordítottan arányos a mintában lévő antigén mennyiségével.
- A közvetett módszer a leggyakoribb. Ebben az esetben a reakciókomponens radioimmunoassay-je olyan, mint a kontroll és a teszt szérum, a szorbenshez kötött antigének vagy antitestek, izotópokkal jelölt antitestek, pufferoldatok. A diagnosztizált antitestek vagy antigének reagálnak a szorbenshez kötött antigénekkel vagy antitestekkel. Ezután az inkubált anyagot eltávolítják, jelölt antitesteket fecskendeznek be, amelyek megkötődnekantigén-antitest komplexek.
Elemzési módszertan
Tehát a radioimmunoassay-t speciális reagensekkel végezzük. A készletek szabványosak, így semmilyen hiba vagy szabálysértés nem megengedett. A diagnosztikai eredmények megbízhatóak. Az elemzést reggel végzik, ehhez vénás vért vesznek egy személytől. A laboratóriumban a szérumot elválasztják a vértől, amelyet RIA-hoz használnak fel. Ezt a szérumot reagensekkel keverik össze. A kapott keveréket adott hőmérsékleten termosztátban inkubáljuk.
A szabad és kötött izotópok elkülönülnek a kapott keverékben. Ezt követően a beérkezett anyagot megvizsgálják, és az eredményeket kiszámítják. A radioimmunoassay mechanizmusnak számos lehetősége van. A fent leírt technika egy folyadékfázisú RIA, mivel minden komponens folyékony állapotban van. Van RIA és szilárd fázis, ahol az antitesteket olyan hordozóba helyezik, amely nem oldódik folyadékban.
Diagnosztika elérhetősége
E diagnosztikai módszer alkalmazása az orvostudományban évről évre egyre népszerűbb. Az utóbbi időben a radioimmunoassay standard diagnosztikai módszerré vált, amelyet orvos írhat fel a végső diagnózis felállításakor. Az ilyen típusú elemzéseket sokáig csak laboratóriumokban végezték, mára általános kutatási módszerré vált. A RIA azonban drága berendezéseket (gammaszámlálókat) igényel, és a reagenskészletek rövid élettartamúak. Mindez egy ilyen elemzés fő hátránya, amely meghatározza annakdrága költség.
Ezenkívül a RIA a közelmúltban megkezdte a modernebb kutatási módszerek kiszorítását, amelyek nem igényelnek kölcsönhatást az izotópokkal. Ezek közé tartozik az enzim immunoassay. Így a RIA sok klinikán kívánatos. Régóta használják a nagyvárosokban és a diagnosztikai központokban, de a kisvárosok közönséges kórházaiban ezt az elemzést gyakorlatilag nem használják a magas költségek miatt.
RIA méltósága
A radioimmunoassay-nek számos előnye van. Meglehetősen specifikus és nagy érzékenységgel rendelkezik, amely lehetővé teszi a biológiailag aktív anyagok jelenlétének meghatározását hihetetlenül kis mennyiségben. Ezt az elemzést nagyon egyszerűen végzik el, az embernek csak vénás vért kell adnia. A teszteredmények 100%-ban pontosak, és már másnap készen állnak. A RIA könnyen automatizálható is. Így ez az elemzés lehetővé teszi olyan fehérjék azonosítását, amelyek a fertőző baktériumok salakanyagai, ami a fertőzés jelenlétét jelzi a szervezetben.
Diagnózis a virológiában
A legígéretesebb RIA a virológiára vonatkozik, mert lehetővé teszi a vírusos kórokozók gyors azonosítását. Ez annak köszönhető, hogy az utóbbi években egyre növekszik a különféle fertőzések előfordulása, amelyek nagy sebességgel terjednek, és halálozást okoznak az emberek körében. Ez különösen igaz azokra az országokra, ahol nincs magastársadalmi és gazdasági fejlődés (a távol-keleti országok), a radioimmunoassay itt egyszerűen nélkülözhetetlen. A mikrobiológia ezt a diagnosztikai módszert alkalmazza a kórokozó baktériumok által okozott fertőző betegségek kimutatására is. Például a RIA-t széles körben használják a tífusz kimutatására. A betegség első napjaiban, a kezelés kijelölése előtt, meg kell vizsgálni a székletet és a hányást. A diagnosztikai eredményeket azonban hosszú idő után kapjuk meg. Itt a RIA segít, az elemzés lehetővé teszi a betegség kórokozójának rövid időn belüli azonosítását. Egy személy vért ad, másnapra készen állnak a vizsgálat eredményei. Ez az elemzés segít a pontos diagnózis felállításában.
Eredmények
A radioimmunoassay jelenleg az egyik legérzékenyebb diagnosztikai módszer. Bármely olyan anyag elemzésére szolgál, amely ellen antitesteket lehet nyerni. Ez a módszer lehetővé teszi, hogy a vizsgált folyadék legkisebb térfogatában sok mintát készítsünk, és az eredményeket a lehető legrövidebb időn belül rögzítsük, mivel teljesen automatizálható. Ezt az elemzést Solomon Burson dolgozta ki az 1950-es években. Harminc évvel később széles körben elterjedt. A mai napig nincs száz százalékos alternatívája a RIA-nak, mivel az elemzés nagy érzékenységgel rendelkezik. A RIA-t az orvostudomány különböző ágaiban, valamint a mikrobiológiában és a virológiában használják.
Végre
A módszer virológiában való alkalmazása ma nagyon aktuális, hiszen ada fertőzések terjedésének vizsgálata, a pontos diagnózis felállítása és a specifikus kezelés előírása. Ez a probléma különösen aktuális az alacsony gazdasági és társadalmi fejlettségű országokban. Ezenkívül ez az elemzés lehetővé teszi a hormonok és enzimek mennyiségének kimutatását az emberi szervezetben. A megbízható eredmények elérése érdekében a kutatónak csak vért kell adnia az elemzéshez. Az orvostudomány nem áll meg, a radioimmunoassay mellett új kutatási módszerek jelennek meg, de a RIA továbbra is az egyik vezető szerepet tölt be az orvosi diagnosztikában.
